Բեկումնային հեռանկարային ուսումնասիրություն. PCR-ի վրա հիմնված արյան ctDNA մեթիլացման տեխնոլոգիան բացում է կոլոռեկտալ քաղցկեղի MRD հսկողության նոր դարաշրջանը

Վերջերս JAMA Ուռուցքաբանությունը (IF 33.012) հրապարակեց մի կարևոր հետազոտության արդյունք [1], որին մասնակցել են Ֆուդանի համալսարանի քաղցկեղի հիվանդանոցի պրոֆեսոր Կայ Գու-ռինգը և Շանհայի Ցզյաո Տոնգ համալսարանի բժշկական դպրոցի Ռենջի հիվանդանոցից պրոֆեսոր Վան Ջինգը։ համագործակցություն KUNYUAN BIOLOGY. «Մոլեկուլային մնացորդային հիվանդության վաղ հայտնաբերում և Կոլոռեկտալ քաղցկեղի I-ից III փուլերի ռիսկի շերտավորումը շրջանառվող ուռուցքային ԴՆԹ-ի մեթիլացիայի և ռիսկի շերտավորման միջոցով)»: Այս ուսումնասիրությունն աշխարհում առաջին բազմակենտրոն հետազոտությունն է, որը կիրառել է PCR-ի վրա հիմնված արյան ctDNA բազմածին մեթիլացման տեխնոլոգիա կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնության կանխատեսման և կրկնության մոնիտորինգի համար՝ ապահովելով ավելի ծախսարդյունավետ տեխնիկական ուղի և լուծում՝ համեմատած MRD հայտնաբերման տեխնոլոգիայի առկա մեթոդների հետ, ինչը ակնկալվում է: էապես բարելավել կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնության կանխատեսման և մոնիտորինգի կլինիկական օգտագործումը և զգալիորեն բարելավել հիվանդի գոյատևումն ու կյանքի որակը: Ուսումնասիրությունը բարձր է գնահատվել նաև ամսագրի և նրա խմբագիրների կողմից և նշված է որպես այս համարում հիմնական հանձնարարական, և պրոֆեսոր Խուան Ռուիս-Բանոբրեն Իսպանիայից և պրոֆեսոր Աջայ Գոելը Միացյալ Նահանգներից հրավիրվել են վերանայելու այն: Հետազոտության մասին հայտնել է նաև GenomeWeb-ը՝ ԱՄՆ-ի առաջատար կենսաբժշկական լրատվամիջոցը:

Կոլոռեկտալ քաղցկեղը (CRC) աղեստամոքսային տրակտի տարածված չարորակ ուռուցք է Չինաստանում: 2020-ի Քաղցկեղի հետազոտության միջազգային գործակալության (IARC) տվյալները ցույց են տալիս, որ Չինաստանում 555,000 նոր դեպքերը կազմում են աշխարհի մոտ 1/3-ը, ընդ որում հիվանդացության մակարդակը ցատկում է Չինաստանում տարածված քաղցկեղի երկրորդ տեղը. 286,000 մահը կազմում է աշխարհի մոտ 1/3-ը՝ Չինաստանում քաղցկեղից մահացությունների հինգերորդ ամենատարածված պատճառն է: Չինաստանում մահվան հինգերորդ պատճառը. Հատկանշական է, որ ախտորոշված ​​հիվանդների շրջանում TNM I, II, III և IV փուլերը համապատասխանաբար կազմում են 18.6%, 42.5%, 30.7% և 8.2%: Հիվանդների ավելի քան 80%-ը գտնվում է միջին և ուշ փուլերում, իսկ նրանցից 44%-ի մոտ լյարդի և թոքերի համաժամանակյա կամ հետերոխրոնիկ հեռահար մետաստազներ, որոնք լրջորեն ազդում են գոյատևման շրջանի վրա, վտանգում մեր բնակիչների առողջությունը և ծանր սոցիալ-տնտեսական պատճառ։ բեռը. Համաձայն Քաղցկեղի ազգային կենտրոնի վիճակագրության՝ Չինաստանում կոլոռեկտալ քաղցկեղի բուժման ծախսերի միջին տարեկան աճը կազմում է մոտ 6,9%-ից 9,2%, իսկ հիվանդների անձնական առողջապահական ծախսերը ախտորոշումից հետո մեկ տարվա ընթացքում կարող են կազմել 60%-ը: ընտանիքի եկամուտը. Քաղցկեղով հիվանդները տառապում են հիվանդությամբ, ինչպես նաև մեծ տնտեսական ճնշման տակ [2]։
Կոլոռեկտալ քաղցկեղի ախտահարումների 90 տոկոսը կարող է հեռացվել վիրահատական ​​ճանապարհով, և որքան շուտ հայտնաբերվի ուռուցքը, այնքան բարձր է հնգամյա գոյատևման մակարդակը արմատական ​​վիրահատությունից հետո, բայց ռադիկալ ռեզեկցիայից հետո ռեցիդիվների ընդհանուր մակարդակը դեռ մոտ 30% է: Կոլոռեկտալ քաղցկեղի հնգամյա գոյատևման մակարդակը Չինաստանի բնակչության մոտ կազմում է 90,1%, 72,6%, 53,8% և 10,4%, համապատասխանաբար I, II, III և IV փուլերի համար:
Նվազագույն մնացորդային հիվանդությունը (MRD) արմատական ​​բուժումից հետո ուռուցքի կրկնության հիմնական պատճառն է: Վերջին տարիներին պինդ ուռուցքների MRD հայտնաբերման տեխնոլոգիան արագ առաջադիմել է, և մի քանի ծանր դիտողական և ինտերվենցիոն հետազոտություններ հաստատել են, որ հետվիրահատական ​​MRD կարգավիճակը կարող է ցույց տալ կոլոռեկտալ քաղցկեղի հետվիրահատական ​​կրկնության ռիսկը: ctDNA թեստավորումն ունի ոչ ինվազիվ, պարզ, արագ, նմուշի բարձր հասանելիությամբ և ուռուցքային տարասեռության հաղթահարման առավելություններ:
Հաստ աղիքի քաղցկեղի ԱՄՆ NCCN ուղեցույցները և հաստ աղիքի քաղցկեղի չինական CSCO ուղեցույցները երկուսն էլ նշում են, որ հաստ աղիքի քաղցկեղի հետվիրահատական ​​ռեցիդիվների ռիսկի որոշման և օժանդակ քիմիաթերապիայի ընտրության համար ctDNA թեստը կարող է տրամադրել կանխատեսող և կանխատեսող տեղեկատվություն՝ օգնելու օժանդակ բուժման որոշումներին II փուլով հիվանդների համար: կամ III հաստ աղիքի քաղցկեղ: Այնուամենայնիվ, գոյություն ունեցող հետազոտությունների մեծ մասը կենտրոնացած է ctDNA մուտացիաների վրա՝ հիմնված բարձր թողունակության հաջորդականության տեխնոլոգիայի (NGS) վրա, որն ունի բարդ գործընթաց, երկարաժամկետ ժամկետ և բարձր արժեք [3]՝ ընդհանրացման մի փոքր բացակայությամբ և քաղցկեղով հիվանդների շրջանում ցածր տարածվածությամբ:
Կոլոռեկտալ քաղցկեղով III փուլի հիվանդների դեպքում NGS-ի վրա հիմնված ctDNA դինամիկ մոնիտորինգն արժե մինչև $10,000 մեկ այցելության համար և պահանջում է մինչև երկու շաբաթ սպասման ժամանակահատված: Այս հետազոտության բազմածին մեթիլացման թեստի միջոցով՝ ColonAiQ®, հիվանդները կարող են դինամիկ ctDNA մոնիտորինգ ունենալ արժեքի տասներորդով և ստանալ հաշվետվություն ընդամենը երկու օրվա ընթացքում:
Համաձայն Չինաստանում տարեկան կոլոռեկտալ քաղցկեղի 560,000 նոր դեպքերի, հիմնականում II-III փուլերի կոլոռեկտալ քաղցկեղով կլինիկական հիվանդները (համամասնությունը մոտ 70%) ունեն ավելի հրատապ պահանջարկ դինամիկ մոնիտորինգի համար, քան MRD-ի դինամիկ մոնիտորինգի շուկայական չափը: կոլոռեկտալ քաղցկեղը ամեն տարի հասնում է միլիոնավոր մարդկանց:
Երևում է, որ հետազոտության արդյունքները կարևոր գիտական ​​և գործնական նշանակություն ունեն։ Լայնածավալ հեռանկարային կլինիկական հետազոտությունների միջոցով հաստատվել է, որ PCR-ի վրա հիմնված արյան ctDNA բազմածին մեթիլացման տեխնոլոգիան կարող է օգտագործվել կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնության կանխատեսման և ռեցիդիվների մոնիտորինգի համար ինչպես զգայունությամբ, այնպես էլ ժամանակին և ծախսարդյունավետությամբ՝ ավելի լավ հնարավորություն տալով ճշգրիտ դեղամիջոցներին օգուտ բերել ավելի շատ քաղցկեղով հիվանդների: . Ուսումնասիրությունը հիմնված է ColonAiQ®-ի՝ KUNY-ի կողմից մշակված կոլոռեկտալ քաղցկեղի բազմագենի մեթիլացման թեստի վրա, որի կլինիկական կիրառման արժեքը վաղ սկրինինգի և ախտորոշման ժամանակ հաստատվել է կենտրոնական կլինիկական ուսումնասիրությամբ:
Գաստրոէնտերոլոգիան (IF33.88)՝ 2021 թվականին ստամոքս-աղիքային հիվանդությունների ոլորտում լավագույն միջազգային ամսագիրը, զեկուցել է Ֆուդանի համալսարանի Zhongshan հիվանդանոցի, Fudan University-ի քաղցկեղի հիվանդանոցի և այլ հեղինակավոր բժշկական հաստատությունների բազմակենտրոն հետազոտության արդյունքները՝ KUNYAN Biological-ի հետ համատեղ, որը հաստատել է. ColonAiQ® ChangAiQ®-ի գերազանց կատարումը կոլոռեկտալ հիվանդությունների վաղ սկրինինգի և վաղ ախտորոշման գործում քաղցկեղը, և ի սկզբանե ուսումնասիրվել է այն նաև ուսումնասիրում է պոտենցիալ կիրառությունը կոլոռեկտալ քաղցկեղի կանխատեսման մոնիտորինգում:

Ռիսկի շերտավորման մեջ ctDNA մեթիլացիայի կլինիկական կիրառումը հաստատելու համար, ուղղորդելով բուժման որոշումները և վաղ ռեցիդիվների մոնիտորինգը կոլոռեկտալ քաղցկեղի I-III փուլերում, հետազոտական ​​թիմը ներառել է I-III փուլով կոլոռեկտալ քաղցկեղով 299 հիվանդի, ովքեր ենթարկվել են արմատական ​​վիրահատության և արյան նմուշներ հավաքել: յուրաքանչյուր հաջորդ կետ (երեք ամսվա տարբերությամբ) վիրահատությունից առաջ մեկ շաբաթվա ընթացքում, վիրահատությունից հետո մեկ ամսվա ընթացքում և դինամիկ արյան հետվիրահատական ​​օժանդակ թերապիայի ժամանակ ctDNA թեստավորում.
Նախ, պարզվեց, որ ctDNA թեստը կարող է կանխատեսել կոլոռեկտալ քաղցկեղով հիվանդների մոտ վաղ շրջանի կրկնության ռիսկը՝ ինչպես նախավիրահատական, այնպես էլ վաղ հետվիրահատական ​​շրջանում: Նախավիրահատական ​​ctDNA դրական հիվանդներն ունեին հետվիրահատական ​​կրկնության ավելի մեծ հավանականություն, քան նախավիրահատական ​​ctDNA բացասական հիվանդները (22.0% > 4.7%): Վաղ հետվիրահատական ​​ctDNA թեստը դեռևս կանխատեսում էր ռեցիդիվների վտանգը. ռադիկալ ռեզեկցիայից մեկ ամիս անց ctDNA դրական հիվանդների մոտ 17,5 անգամ ավելի հավանական է կրկնվել, քան բացասական հիվանդները; Թիմը նաև պարզել է, որ ctDNA-ի և CEA-ի համակցված փորձարկումը փոքր-ինչ բարելավում է ռեցիդիվը հայտնաբերելու գործում (AUC=0.849), սակայն տարբերությունը նշանակալի չէր միայն ctDNA-ի (AUC=0.839) փորձարկման համեմատ: Տարբերությունը նշանակալի չէր միայն ctDNA-ի համեմատ (AUC=): 0,839):
Կլինիկական փուլավորումը՝ զուգորդված ռիսկի գործոնների հետ, ներկայումս հանդիսանում է քաղցկեղով հիվանդների ռիսկի շերտավորման հիմնական հիմքը, և ներկայիս հարացույցում մեծ թվով հիվանդներ դեռ կրկնվում են [4], և հրատապ կարիք կա ավելի լավ շերտավորման գործիքների՝ որպես գերբուժում և բուժում։ Կլինիկայում գոյություն ունեն անբավարար բուժում: Ելնելով դրանից՝ թիմը դասակարգեց կոլոռեկտալ քաղցկեղով III փուլով հիվանդներին տարբեր ենթախմբերի՝ հիմնված կլինիկական կրկնության ռիսկի գնահատման վրա (բարձր ռիսկ (T4/N2) և ցածր ռիսկ (T1-3N1)) և օժանդակ բուժման ժամանակահատվածը (3/6 ամիս): Վերլուծությունը ցույց է տվել, որ ctDNA-դրական հիվանդների բարձր ռիսկային ենթախմբում գտնվող հիվանդների մոտ կրկնվելու ավելի ցածր մակարդակ է գրանցվել, եթե նրանք ստացել են վեց ամիս ադյուվանտային թերապիա; ctDNA դրական հիվանդների ցածր ռիսկային ենթախմբում էական տարբերություն չկար օժանդակ բուժման ցիկլի և հիվանդի արդյունքների միջև. մինչդեռ ctDNA-բացասական հիվանդներն ունեին զգալիորեն ավելի լավ կանխատեսում, քան ctDNA-դրական հիվանդները և հետվիրահատական ​​առանց կրկնության ավելի երկար ժամանակաշրջան (RFS); I փուլ և ցածր ռիսկային փուլ II կոլոռեկտալ քաղցկեղ Բոլոր ctDNA բացասական հիվանդները երկու տարվա ընթացքում չեն կրկնվել; հետևաբար, ctDNA-ի ինտեգրումը կլինիկական առանձնահատկությունների հետ ակնկալվում է, որ հետագայում կօպտիմալացնի ռիսկերի շերտավորումը և ավելի լավ կանխատեսի ռեցիդիվը:

Նկար 1. Պլազմայի ctDNA վերլուծություն POM1-ում՝ կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնության վաղ հայտնաբերման համար
Դինամիկ ctDNA թեստավորման հետագա արդյունքները ցույց են տվել, որ ռեցիդիվների ռիսկը զգալիորեն ավելի բարձր է եղել դրական դինամիկ ctDNA թեստով հիվանդների մոտ, քան բացասական ctDNA-ով հիվանդների մոտ վերջնական բուժումից հետո հիվանդության կրկնության մոնիտորինգի փուլում (արմատական ​​վիրահատությունից հետո + օժանդակ թերապիայից հետո) (Նկար 3ACD): և որ ctDNA-ն կարող է ցույց տալ ուռուցքի կրկնությունը մինչև 20 ամիս շուտ, քան պատկերազարդումը (Նկար 3B), ինչը հնարավորություն է տալիս հիվանդության կրկնության վաղ հայտնաբերում և ժամանակին միջամտություն:

Նկար 2. ctDNA վերլուծություն՝ հիմնված երկայնական խմբի վրա՝ կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնությունը հայտնաբերելու համար

«Կոլոռեկտալ քաղցկեղի մեծ թվով թարգմանական բժշկության ուսումնասիրություններն առաջնորդում են կարգապահությունը, հատկապես ctDNA-ի վրա հիմնված MRD թեստը ցույց է տալիս մեծ ներուժ՝ ուժեղացնելու կոլոռեկտալ քաղցկեղով հիվանդների հետվիրահատական ​​կառավարումը` հնարավոր դարձնելով ռեցիդիվների ռիսկի շերտավորումը, ուղղորդելով բուժման որոշումները և վաղ ռեցիդիվների մոնիտորինգը:

ԴՆԹ մեթիլացումը որպես նոր MRD մարկեր ընտրելու առավելությունը մուտացիայի հայտնաբերման նկատմամբ այն է, որ այն չի պահանջում ուռուցքային հյուսվածքների ամբողջական գենոմային հաջորդականության սքրինինգ, ուղղակիորեն օգտագործվում է արյան թեստավորման համար և խուսափում է կեղծ դրական արդյունքներից՝ նորմալից առաջացող սոմատիկ մուտացիաների հայտնաբերման պատճառով: հյուսվածքներ, բարորակ հիվանդություններ և կլոնային արյունաստեղծություն:
Այս ուսումնասիրությունը և հարակից այլ ուսումնասիրությունները հաստատում են, որ ctDNA-ի վրա հիմնված MRD թեստը I-III փուլերի կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնության կարևորագույն անկախ ռիսկային գործոնն է և կարող է օգտագործվել բուժման որոշումներ կայացնելու համար, ներառյալ ադյուվանտային թերապիայի «էսկալացիան» և «նվազեցումը»: MRD-ը I-III փուլերի կոլոռեկտալ քաղցկեղի վիրահատությունից հետո կրկնության ամենակարևոր անկախ ռիսկային գործոնն է:
MRD-ի ոլորտը արագորեն զարգանում է մի շարք նորարարական, խիստ զգայուն և հատուկ փորձարկումներով, որոնք հիմնված են էպիգենետիկայի (ԴՆԹ-ի մեթիլացում և ֆրագմենտոմիկա) և գենոմիկայի (գերխորը նպատակային հաջորդականություն կամ ամբողջ գենոմի հաջորդականություն): Մենք ակնկալում ենք, որ ColonAiQ®-ը կշարունակի կազմակերպել լայնածավալ կլինիկական հետազոտություններ և կարող է դառնալ MRD թեստավորման նոր ցուցիչ, որը համատեղում է մատչելիությունը, բարձր արդյունավետությունը և մատչելիությունը և կարող է լայնորեն օգտագործվել սովորական կլինիկական պրակտիկայում»:
Հղումներ
[1] Mo S, Ye L, Wang D, Han L, Zhou S, Wang H, Dai W, Wang Y, Luo W, Wang R, Xu Y, Cai S, Liu R, Wang Z, Cai G. Վաղ հայտնաբերում Մոլեկուլային մնացորդային հիվանդություն և ռիսկի շերտավորում կոլոռեկտալ քաղցկեղի I-3 փուլերի համար՝ շրջանառվող ուռուցքային ԴՆԹ-ի մեթիլացիայի միջոցով: ՋԱՄԱ Օնկոլ. 2023 ապրիլի 20.
[2] «Կոլոռեկտալ քաղցկեղի հիվանդության բեռը չինական բնակչության մեջ. փոխվե՞լ է այն վերջին տարիներին: , Չինական համաճարակաբանության ամսագիր, հատ. 41, թիվ 10, հոկտեմբերի 2020 թ.
[3] Տարազոնա Ն, Գիմենո-Վալիենտե Ֆ, Գամբարդելա Վ և այլն: Շրջանառվող ուռուցքային ԴՆԹ-ի հաջորդ սերնդի նպատակային հաջորդականացում՝ տեղայնացված հաստ աղիքի քաղցկեղի նվազագույն մնացորդային հիվանդությանը հետևելու համար: Էնն Օնկոլ. Նոյեմբերի 1, 2019; 30 (11): 1804-1812:
[4] Taieb J, André T, Auclin E. Refining adjuvant թերապիա ոչ մետաստատիկ հաստ աղիքի քաղցկեղի համար, նոր չափանիշներ և հեռանկարներ: Cancer Treat Rev. 2019; 75:1-11.