Բեկումնային հեռանկարային ուսումնասիրություն. PCR-ի վրա հիմնված արյան ctDNA մեթիլացման տեխնոլոգիան բացում է կոլոռեկտալ քաղցկեղի MRD հսկողության նոր դարաշրջանը

Վերջերս JAMA Ուռուցքաբանությունը (IF 33.012) հրապարակել է մի կարևոր հետազոտության արդյունք [1], որը կատարել է պրոֆեսոր Կայ Գուո-ռինգը Ֆուդանի համալսարանի քաղցկեղի հիվանդանոցից և պրոֆ. Վան Ջինգը Շանհայի Ցզյաո Տոնգ համալսարանի բժշկական դպրոցի Ռենջի հիվանդանոցից՝ համագործակցելով KUNYUAN DiEarsecularedecularase: Կոլոռեկտալ քաղցկեղի I-ից III փուլերի ռիսկի շերտավորումը շրջանառվող ուռուցքային ԴՆԹ-ի մեթիլացիայի և ռիսկի շերտավորման միջոցով)»: Այս հետազոտությունն աշխարհում առաջին բազմակենտրոն հետազոտությունն է, որը կիրառել է PCR-ի վրա հիմնված արյան ctDNA բազմածին մեթիլացման տեխնոլոգիա կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնության կանխատեսման և կրկնության մոնիտորինգի համար՝ ապահովելով ավելի ծախսարդյունավետ տեխնիկական ուղի և լուծում՝ համեմատած MRD հայտնաբերման առկա տեխնոլոգիական մեթոդների հետ: Ուսումնասիրությունը բարձր է գնահատվել նաև ամսագրի և նրա խմբագիրների կողմից և նշված է որպես այս համարում հիմնական հանձնարարական, և պրոֆեսոր Խուան Ռուիս-Բանոբրեն Իսպանիայից և պրոֆեսոր Աջայ Գոելը Միացյալ Նահանգներից հրավիրվել են վերանայելու այն: Հետազոտության մասին հայտնել է նաև GenomeWeb-ը՝ ԱՄՆ-ի առաջատար կենսաբժշկական լրատվամիջոցը:

Կոլոռեկտալ քաղցկեղը (CRC) աղեստամոքսային տրակտի տարածված չարորակ ուռուցք է Չինաստանում: 2020-ի Քաղցկեղի հետազոտության միջազգային գործակալության (IARC) տվյալները ցույց են տալիս, որ Չինաստանում 555,000 նոր դեպքերը կազմում են աշխարհի մոտ 1/3-ը, ընդ որում հիվանդացության մակարդակը ցատկում է Չինաստանում տարածված քաղցկեղի երկրորդ տեղը. 286,000 մահը կազմում է աշխարհի մոտ 1/3-ը՝ Չինաստանում քաղցկեղից մահացությունների հինգերորդ ամենատարածված պատճառն է: Չինաստանում մահվան հինգերորդ պատճառը. Հատկանշական է, որ ախտորոշված ​​հիվանդների շրջանում TNM I, II, III և IV փուլերը համապատասխանաբար կազմում են 18.6%, 42.5%, 30.7% և 8.2%: Հիվանդների 80%-ից ավելին գտնվում են միջին և ուշ փուլերում, իսկ նրանցից 44%-ի մոտ լյարդի և թոքերի համաժամանակյա կամ հետերոխրոնիկ հեռավոր մետաստազներ են, որոնք լրջորեն ազդում են գոյատևման շրջանի վրա, վտանգում մեր բնակիչների առողջությունը և ծանր սոցիալական և տնտեսական բեռ են առաջացնում։ Համաձայն Քաղցկեղի ազգային կենտրոնի վիճակագրության՝ Չինաստանում կոլոռեկտալ քաղցկեղի բուժման ծախսերի միջին տարեկան աճը կազմում է մոտ 6,9%-ից 9,2%, իսկ հիվանդների անձնական առողջության ծախսերը ախտորոշումից հետո մեկ տարվա ընթացքում կարող են կազմել ընտանիքի եկամտի 60%-ը: Քաղցկեղով հիվանդները տառապում են հիվանդությամբ, ինչպես նաև մեծ տնտեսական ճնշման տակ [2]։
Կոլոռեկտալ քաղցկեղի ախտահարումների 90 տոկոսը կարող է հեռացվել վիրահատական ​​ճանապարհով, և որքան շուտ հայտնաբերվի ուռուցքը, այնքան բարձր է հնգամյա գոյատևման մակարդակը արմատական ​​վիրահատությունից հետո, բայց ռադիկալ ռեզեկցիայից հետո ռեցիդիվների ընդհանուր մակարդակը դեռ մոտ 30% է: Կոլոռեկտալ քաղցկեղի հնգամյա գոյատևման մակարդակը Չինաստանի բնակչության մոտ կազմում է 90,1%, 72,6%, 53,8% և 10,4%, համապատասխանաբար I, II, III և IV փուլերի համար:
Նվազագույն մնացորդային հիվանդությունը (MRD) արմատական ​​բուժումից հետո ուռուցքի կրկնության հիմնական պատճառն է: Վերջին տարիներին պինդ ուռուցքների MRD հայտնաբերման տեխնոլոգիան արագ առաջադիմել է, և մի քանի ծանր դիտողական և ինտերվենցիոն հետազոտություններ հաստատել են, որ հետվիրահատական ​​MRD կարգավիճակը կարող է ցույց տալ կոլոռեկտալ քաղցկեղի հետվիրահատական ​​կրկնության ռիսկը: ctDNA թեստավորումն ունի ոչ ինվազիվ, պարզ, արագ, նմուշի բարձր հասանելիությամբ և ուռուցքային տարասեռության հաղթահարման առավելություններ:
Հաստ աղիքի քաղցկեղի ԱՄՆ NCCN ուղեցույցները և հաստ աղիքի քաղցկեղի չինական CSCO ուղեցույցները երկուսն էլ նշում են, որ հաստ աղիքի քաղցկեղի հետվիրահատական ​​ռեցիդիվների ռիսկի որոշման և օժանդակ քիմիաթերապիայի ընտրության համար ctDNA թեստը կարող է կանխատեսող և կանխատեսող տեղեկատվություն տրամադրել՝ օգնելու ադյուվանտ բուժման որոշումներ կայացնել հաստ աղիքի II կամ III փուլով հիվանդների համար: Այնուամենայնիվ, գոյություն ունեցող հետազոտությունների մեծ մասը կենտրոնացած է ctDNA մուտացիաների վրա՝ հիմնված բարձր թողունակության հաջորդականության տեխնոլոգիայի (NGS) վրա, որն ունի բարդ գործընթաց, երկարաժամկետ ժամկետ և բարձր արժեք [3]՝ ընդհանրացման մի փոքր բացակայությամբ և քաղցկեղով հիվանդների շրջանում ցածր տարածվածությամբ:
Կոլոռեկտալ քաղցկեղով III փուլի հիվանդների դեպքում NGS-ի վրա հիմնված ctDNA դինամիկ մոնիտորինգն արժե մինչև $10,000 մեկ այցելության համար և պահանջում է մինչև երկու շաբաթ սպասման ժամանակահատված: Այս հետազոտության բազմածին մեթիլացման թեստի միջոցով՝ ColonAiQ®, հիվանդները կարող են դինամիկ ctDNA մոնիտորինգ ունենալ արժեքի տասներորդով և ստանալ հաշվետվություն ընդամենը երկու օրվա ընթացքում:
Համաձայն Չինաստանում տարեկան կոլոռեկտալ քաղցկեղի 560,000 նոր դեպքերի, հիմնականում II-III փուլերի կոլոռեկտալ քաղցկեղով կլինիկական հիվանդները (համամասնությունը մոտ 70%) ունեն դինամիկ մոնիտորինգի ավելի հրատապ պահանջարկ, այնուհետև կոլոռեկտալ քաղցկեղի MRD դինամիկ մոնիտորինգի շուկայական չափը հասնում է միլիոնավոր մարդկանց ամեն տարի:
Երևում է, որ հետազոտության արդյունքները կարևոր գիտական ​​և գործնական նշանակություն ունեն։ Լայնածավալ հեռանկարային կլինիկական հետազոտությունների միջոցով հաստատվել է, որ PCR-ի վրա հիմնված արյան ctDNA բազմածին մեթիլացման տեխնոլոգիան կարող է օգտագործվել կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնության կանխատեսման և ռեցիդիվների մոնիտորինգի համար թե՛ զգայունությամբ, թե՛ ժամանակին և թե՛ ծախսարդյունավետությամբ՝ ավելի լավ հնարավորություն տալով ճշգրիտ դեղամիջոցներին օգուտ բերել ավելի շատ քաղցկեղով հիվանդներին: Ուսումնասիրությունը հիմնված է ColonAiQ®-ի՝ KUNY-ի կողմից մշակված կոլոռեկտալ քաղցկեղի բազմագենի մեթիլացման թեստի վրա, որի կլինիկական կիրառման արժեքը վաղ սկրինինգի և ախտորոշման ժամանակ հաստատվել է կենտրոնական կլինիկական ուսումնասիրությամբ:
Գաստրոէնտերոլոգիան (IF33.88), որը 2021 թվականին ստամոքս-աղիքային հիվանդությունների ոլորտում լավագույն միջազգային ամսագիրն է, զեկուցել է Ֆուդանի համալսարանի Zhongshan հիվանդանոցի, Ֆուդանի համալսարանի քաղցկեղի հիվանդանոցի և այլ հեղինակավոր բժշկական հաստատությունների բազմակենտրոն հետազոտության արդյունքները KUNYAN Biological-ի հետ համատեղ, որոնք հաստատել են ColonngAiQ-ի վաղ ախտորոշման և վաղ գունային ախտորոշման®Q®Q-ի գերազանց կատարումը: քաղցկեղը, և ի սկզբանե ուսումնասիրվել է այն նաև ուսումնասիրում է պոտենցիալ կիրառությունը կոլոռեկտալ քաղցկեղի կանխատեսման մոնիտորինգում:

Ռիսկի շերտավորման մեջ ctDNA մեթիլացիայի կլինիկական կիրառումը հաստատելու, բուժման որոշումներն ուղղորդելու և կոլոռեկտալ քաղցկեղի I-III փուլերում վաղ ռեցիդիվների մոնիտորինգի համար հետազոտական ​​թիմը ներառել է 299 հիվանդի I-III փուլի կոլոռեկտալ քաղցկեղով, ովքեր ենթարկվել են արմատական ​​վիրահատության և արյան նմուշներ հավաքել յուրաքանչյուր հաջորդ կետում (վիրահատությունից հետո վիրահատությունից հետո մեկ ամսվա ընթացքում և դինամիկ արյունից մեկ շաբաթվա ընթացքում: ctDNA թեստավորում.
Նախ, պարզվեց, որ ctDNA թեստը կարող է կանխատեսել կոլոռեկտալ քաղցկեղով հիվանդների մոտ վաղ շրջանի կրկնության ռիսկը՝ ինչպես նախավիրահատական, այնպես էլ վաղ հետվիրահատական ​​շրջանում: Նախավիրահատական ​​ctDNA դրական հիվանդներն ունեին հետվիրահատական ​​կրկնության ավելի մեծ հավանականություն, քան նախավիրահատական ​​ctDNA բացասական հիվանդները (22.0% > 4.7%): Վաղ հետվիրահատական ​​ctDNA թեստը դեռևս կանխատեսում էր ռեցիդիվների վտանգը. ռադիկալ ռեզեկցիայից մեկ ամիս անց ctDNA դրական հիվանդների մոտ 17,5 անգամ ավելի հավանական է կրկնվել, քան բացասական հիվանդները; Թիմը նաև պարզել է, որ ctDNA-ի և CEA-ի համակցված թեստը փոքր-ինչ բարելավում է ռեցիդիվը հայտնաբերելու գործում (AUC=0.849), սակայն տարբերությունը նշանակալի չէր միայն ctDNA-ի (AUC=0.839) փորձարկման համեմատ: Տարբերությունը նշանակալի չէր միայն ctDNA-ի համեմատ (AUC=0.839):
Ռիսկի գործոնների հետ համակցված կլինիկական փուլավորումը ներկայումս հանդիսանում է քաղցկեղով հիվանդների ռիսկի շերտավորման հիմնական հիմքը, և ներկայիս հարացույցում մեծ թվով հիվանդներ դեռ կրկնվում են [4], և հրատապ շերտավորման ավելի լավ գործիքների կարիք կա, քանի որ կլինիկայում գերբուժումն ու անբավարար բուժումը համակցված են: Ելնելով դրանից՝ թիմը դասակարգեց կոլոռեկտալ քաղցկեղով III փուլով հիվանդներին տարբեր ենթախմբերի՝ հիմնված կլինիկական կրկնության ռիսկի գնահատման վրա (բարձր ռիսկ (T4/N2) և ցածր ռիսկ (T1-3N1)) և օժանդակ բուժման ժամանակահատվածը (3/6 ամիս): Վերլուծությունը ցույց է տվել, որ ctDNA-դրական հիվանդների բարձր ռիսկային ենթախմբում գտնվող հիվանդների մոտ կրկնվելու ավելի ցածր մակարդակ է գրանցվել, եթե նրանք ստացել են վեց ամիս ադյուվանտային թերապիա; ctDNA դրական հիվանդների ցածր ռիսկային ենթախմբում էական տարբերություն չկար օժանդակ բուժման ցիկլի և հիվանդի արդյունքների միջև. մինչդեռ ctDNA-բացասական հիվանդներն ունեին զգալիորեն ավելի լավ կանխատեսում, քան ctDNA-դրական հիվանդները և հետվիրահատական ​​առանց կրկնության ավելի երկար ժամանակաշրջան (RFS); I փուլ և ցածր ռիսկային փուլ II կոլոռեկտալ քաղցկեղ Բոլոր ctDNA բացասական հիվանդները երկու տարվա ընթացքում չեն կրկնվել; հետևաբար, ctDNA-ի ինտեգրումը կլինիկական առանձնահատկությունների հետ ակնկալվում է, որ հետագայում կօպտիմալացնի ռիսկերի շերտավորումը և ավելի լավ կանխատեսի ռեցիդիվը:

Նկար 1. Պլազմայի ctDNA վերլուծություն POM1-ում՝ կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնության վաղ հայտնաբերման համար
Դինամիկ ctDNA թեստավորման հետագա արդյունքները ցույց են տվել, որ ռեցիդիվը զգալիորեն ավելի բարձր է եղել դրական դինամիկ ctDNA թեստով հիվանդների մոտ, քան բացասական ctDNA-ով հիվանդների մոտ վերջնական բուժումից հետո հիվանդության կրկնության մոնիտորինգի փուլում (արմատական ​​վիրահատությունից հետո + օժանդակ թերապիայից հետո) (Գծապատկեր 3ACD), և որ ctDNA-ն կարող է ցույց տալ ուռուցքի կրկնության ավելի վաղ պատկերացում (Նկար 3 ամիս առաջ առաջարկելով): հիվանդության կրկնության վաղ հայտնաբերում և ժամանակին միջամտություն:

Նկար 2. ctDNA վերլուծություն՝ հիմնված երկայնական խմբի վրա՝ կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնությունը հայտնաբերելու համար

«Կոլոռեկտալ քաղցկեղի մեծ թվով թարգմանական բժշկության ուսումնասիրություններն առաջնորդում են կարգապահությունը, հատկապես ctDNA-ի վրա հիմնված MRD թեստը ցույց է տալիս մեծ ներուժ՝ ուժեղացնելու կոլոռեկտալ քաղցկեղով հիվանդների հետվիրահատական ​​կառավարումը` հնարավոր դարձնելով ռեցիդիվների ռիսկի շերտավորումը, ուղղորդելով բուժման որոշումները և վաղ ռեցիդիվների մոնիտորինգը:

ԴՆԹ մեթիլացումը որպես նոր MRD մարկեր ընտրելու առավելությունն այն է, որ այն չի պահանջում ուռուցքային հյուսվածքների ամբողջական գենոմի հաջորդականության ստուգում, ուղղակիորեն օգտագործվում է արյան թեստավորման համար և խուսափում է կեղծ դրական արդյունքներից՝ նորմալ հյուսվածքներից, բարորակ հիվանդություններից և կլոնային արյունաստեղծությունից առաջացող սոմատիկ մուտացիաների հայտնաբերման պատճառով:
Այս ուսումնասիրությունը և հարակից այլ ուսումնասիրությունները հաստատում են, որ ctDNA-ի վրա հիմնված MRD թեստը I-III փուլերի կոլոռեկտալ քաղցկեղի կրկնության ամենակարևոր անկախ ռիսկային գործոնն է և կարող է օգտագործվել բուժման որոշումներ կայացնելու համար, ներառյալ օժանդակ թերապիայի «էսկալացիան» և «նվազեցնելը» MRD-ը I-III փուլերի վիրահատությունից հետո կրկնության ամենակարևոր անկախ ռիսկի գործոնն է:
MRD-ի ոլորտը արագորեն զարգանում է մի շարք նորարարական, խիստ զգայուն և հատուկ փորձարկումներով, որոնք հիմնված են էպիգենետիկայի (ԴՆԹ-ի մեթիլացում և ֆրագմենտոմիկա) և գենոմիկայի (գերխորը նպատակային հաջորդականություն կամ ամբողջ գենոմի հաջորդականություն): Մենք ակնկալում ենք, որ ColonAiQ®-ը կշարունակի կազմակերպել լայնածավալ կլինիկական հետազոտություններ և կարող է դառնալ MRD թեստավորման նոր ցուցիչ, որը համատեղում է մատչելիությունը, բարձր արդյունավետությունը և մատչելիությունը և կարող է լայնորեն օգտագործվել սովորական կլինիկական պրակտիկայում»:
Հղումներ
[1] Mo S, Ye L, Wang D, Han L, Zhou S, Wang H, Dai W, Wang Y, Luo W, Wang R, Xu Y, Cai S, Liu R, Wang Z, Cai G. Մոլեկուլային մնացորդային հիվանդության վաղ հայտնաբերում և ռիսկի շերտավորում I-ից III աստիճանի կոլորեկտալ քաղցկեղի ԴՆԹ-էթիլուլյացիայի միջոցով: ՋԱՄԱ Օնկոլ. 2023 ապրիլի 20.
[2] «Կոլոռեկտալ քաղցկեղի հիվանդության ծանրաբեռնվածությունը չինական բնակչության մեջ. փոխվե՞լ է այն վերջին տարիներին: Համաճարակաբանության չինական ամսագիր, հատոր 41, թիվ 10, Հոկտեմբեր 2020:
[3] Տարազոնա Ն, Գիմենո-Վալիենտե Ֆ, Գամբարդելա Վ և այլն: Շրջանառվող ուռուցքային ԴՆԹ-ի հաջորդ սերնդի նպատակային հաջորդականացում՝ տեղայնացված հաստ աղիքի քաղցկեղի նվազագույն մնացորդային հիվանդությանը հետևելու համար: Էնն Օնկոլ. Նոյեմբերի 1, 2019; 30 (11): 1804-1812:
[4] Taieb J, André T, Auclin E. Refining adjuvant թերապիա ոչ մետաստատիկ հաստ աղիքի քաղցկեղի համար, նոր չափանիշներ և հեռանկարներ: Cancer Treat Rev. 2019; 75:1-11.